Métodos microbiolóxicos para estudo de auga, solo e aire

Microorganismos - obras minúsculas, principalmente unicelulares, que son amplamente distribuídos na natureza. Son atopados en todos os medios (aire, solo, auga) en humanos e animais, nas plantas.

diversidade cualitativa e número de organismos depender principalmente de compostos nutricionais. Pero tamén é importante como humidade, temperatura, aeração e acción da luz solar e outros factores.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Métodos para medios naturais sanitaria e estudos microbiológicos pode detectar a presenza de axentes patóxenos e para determinar a súa cantidade, de conformidade cos resultados obtidos, para tomar medidas para eliminar ou evitar enfermidades infecciosas. Ademais, conta cuantitativa é necesaria para a modelaxe de ecosistema eo desenvolvemento dos procesos naturais de goberno. . Imos considerar aínda cales son os métodos de exame microbiolóxico.

solo

É considerado polos estudiosos como unha das posibles vías de transmisión de patoloxías infecciosas. Con secrecións paciente humano ou animal en axentes patóxenos do solo penetrante. Algúns deles, en particular, esporas, poden persistir no solo por un longo tempo (ás veces por décadas). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Os axentes patóxenos inclúen solo tales infeccións perigosas como tétano, antraz, botulismo, e así por diante. Métodos de estudo sanitario-microbiolóxica do solo permiten definir "Conta microbiana" (o número de microorganismos no solo dun gramo), e índice de E. coli (o número de E. coli) .

análise do solo: unha visión xeral

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Métodos para exame microbiolóxico do solo debe ser atribuído principalmente microscopia directa e cultura sobre sólidos medio nutriente. Poboacións de microorganismos e os seus grupos que habitan o solo, difiren no estatuto taxonómico e funcións ecolóxicas. Na ciencia, están unidos baixo o termo xenérico "biota do chan." Primer - hábitat gran número de microorganismos. En gramos de chan está presente desde 1-10000000000 das súas células. Neste ambiente, leva activamente descomposición de materia orgánica, coa participación de varios microorganismos saprófitas.

O estudo microscópico método microbiolóxico: os pasos

Análise do medio comeza con mostraxe. Para estes efectos, previamente peladas e alcohol relado coitelo (pa se pode empregar). Despois diso, a preparación da mostra. O seguinte paso - contar as células esfregaços coloreados. Considero cada etapa por separado.

mostraxe

Na análise de solos agrícolas tenden mostra tomada desde unha profundidade de toda a capa. En primeiro lugar eliminado 2-3 cm por enriba do chan, xa que poden estar presentes nunha microflora estraña. Logo cunha superficie de terreo estudado tomar monolitos. A lonxitude de cada un deles debe estar de acordo coa espesor da capa a partir do cal quere probar.

Nun terreo de 100-200 sq. 7-10 m mostras seleccionadas. O peso de cada - da orde de 0,5 kg. As mostras deben ser mesturados completamente no saco. Logo tomar a mostra medio pesando aproximadamente 1 kg. Debe ser colocado pergamiño embalaxe (estéril) pechado nun saco de pano. Antes da análise da mostra almacenado na neveira dirixir.

preparación busca

O chan axitada vertida en vidro seco. A súa condición limpeza con alcohol e queimar por riba do queimador. Cunha espátula de solo ben mesturada e uniformemente expandidos. É obrigatorio para eliminar as raíces e demais elementos estranxeiros. Para iso, utiliza unha pinza. Antes de pinzas de operación e espátula riba do queimador inflamado e deixada arrefriar.

Das varias parcelas de solo distribuídos sobre o vidro, seleccionado pequenas porcións. Eles pesaron nun prato de porcelana nunha escala técnica. является специальная обработка образца. método microscópico paso obrigatorio de estudos microbiolóxicos é o procesamento especial da mostra. 2 debe ser preparados con antelación, frasco estéril. O seu tamaño non debe exceder 250 ml. Un dos frascos é vertida en 100 ml de auga da billa. Porque leva 0,4-0,8 ml da mostra de líquido de chan e humedecido con un cartafol. A mestura debe ser fregada con un dedo ou de goma pilão durante 5 minutos.

Auga desde o primeiro globo foi trasladado a masa de chan globo branco. Ademais, fregando as súas costas. Tras esa masa é trasladado a un bote de preto a chama do fogar. Recipiente con suspensión do solo foi axitada nun axitador durante 5 min. Logo foi deixada a asentar durante uns 30 segundos. Isto é necesario, a fin de permitir que as grandes partículas de resolver. Tras media dunha masa minutos emprégase para preparar a preparación.

As contas móbiles en esfregaços fixos

, разработанному Виноградским. estudo microscópico directo do solo é realizada polo método de estudos microbiolóxicos, desenvolvido Vinogradskii. En certo volume de suspensión foi contado o número de células de microorganismos. Estudando esfregaços fixos pode almacenar fármacos a longo termo e realizar cálculos, en calquera momento.

Preparación de drogas como segue. Unha certa cantidade de barro (polo xeral de 0,02-0,05 ml) se aplica cunha micropipeta sobre a lámina. A esta solución foi engadida unha gota de agar-agar (Polisacárido agaropectina mestura de agarose e extraído de algas castañas e vermellas do Mar Negro), axitou-se rapidamente e estendida por unha área 4-6 sq. cm. Pap secas ao aire e fixadas durante 20-30 minutos. alcohol (96%). A continuación, a droga humedecido con auga destilada e puxo-se o p-p carbólico Eritrosina 20-30 min.

Tras a cor, que é lavado e seco ao aire. As contas de células realizadas desde a lente de inmersión.

Sementando en medios sólidos

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. métodos microscópicos para exame microbiolóxico pode detectar un gran número de microorganismos. Pero, a pesar diso, o método de inoculação é o máis común na práctica. A súa esencia consiste sementar cantidade de drogas (suspensión de chan) nunha placa de Petri sobre un medio sólido.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Este método de investigación microbiológica ten en conta non só a cantidade, senón tamén o grupo e, nalgúns casos, ea composición de especies de flora microscópicas. Contando o número de colonias producidas, normalmente desde o fondo da tarxeta de Petri en luz transmitida. Na área calculada colocado marcador de pintura ou de puntos.

Análise de auga

A microflora do corpo de auga, como regra xeral, reflicte a composición microbiana do solo en torno a el. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Neste contexto, os métodos de análise sanitaria-microbiolóxica da auga e do solo son de particular importancia práctica no estudo do estado dun determinado ecosistema. A auga fresca contén, como regra xeral, cocos, as bacterias con forma de bastonete.

Anaerobios en auga atopada en pequenas cantidades. Como norma xeral, se multiplican no fondo dos corpos de auga, no barro, participando no proceso de desinfección. océanos microflora e mares vantaxosamente representado bacterias halofíticas (halofílicas).

Na auga, pozos artesianos son practicamente non hai microorganismos. Isto é debido á capacidade de filtrado da capa de solo.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Os métodos convencionais de investigación microbiológica da auga considerada a definición de índice se microbiana e coli-titulación ou. O primeiro indicador define o número de bacterias en 1 ml de líquido. coli índice representa o número de coliformes presentes nun litro de auga, e se tulo de - o número mínimo ou máximo de líquido de dilución na que poden aínda ser detectadas.

Determinación do número microbiana

Este método sanitaria exame microbiolóxico das augas é como segue. En 1 ml de auga é determinado número de Anaerobios Facultativos e mesofílicas (intermedio) aeróbicos capaz de carne en peptona-agar (medio primario) a 37 º C. durante o día co fin de formar colonias visíbeis a unha ampliación de 2-5 p. ou a simple vista.

является посев. O paso clave do método de análise microbiolóxica da auga é sementada. Xa que cada mostra é sementada, polo menos, 2 volumes diferentes. Cando a análise de auga da billa en cada vaso está feito de 1-0.1 ml de líquido puro e contaminado 0.01-0.001 ml. Á inoculação de 0,1 ml ou menor volume de fluído é diluída con auga destilada (estéril). Consistente preparar dilucións decimais. 1 ml de cada un deles está feito en dúas placas de Petri.

Breeding Explique Agar nutriente. Debe primeiro derreter, e legal a 45 graos. Despois de se trasfega, a forma activa é deixada sobre unha superficie horizontal para a solidificación. A 37 graos. culturas son cultivadas durante todo o día. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. O método considerado de investigación microbiológica da auga ten en conta os resultados destes pratos onde o número de colonias na franxa de 30 a 300.

aire

É considerado un terreo de tránsito para os microorganismos. являются седиментация (оседание) и аспирация. Os principais métodos de estudos microbiolóxicos son sedimentación aire (decantación) e aspiración.

ambiente aire microflora é arbitrariamente dividido en variable e constante. O primeiro grupo inclúe léveda, cocos cromogénico, de esporas de Bacillus coli e outros microorganismos que son resistentes o secado, a exposición á luz. Representantes da microflora variable, que penetran no aire do seu hábitat normal, longa manteñen a súa vitalidade.

No aire das cidades microorganismos moito máis que no ámbito de aire das zonas rurais. Ao longo dos mares, bosques son moi poucas bacterias. purificación do aire facilitar a precipitación: neve e choiva. microbios Interior moito máis que en espazos abertos. O seu número é maior no inverno, en ausencia de ventilación regular.

sedimentación

считается простейшим. Este método de investigación microbiológica en microbioloxía é considerado o máis simple. Baséase na sedimentación das gotículas e partículas na superficie do agar nunha placa de Petri aberta por acción da gravidade. método de sedimentación non pode determinar con precisión o número de bacterias no aire. O feito é que, nun vaso aberto para coller a fracción fina das partículas de po e as pingas de orixe bacteriana moi difícil. Na superficie retido principalmente partículas grandes.

Este método non é utilizado para a análise do aire. Este ambiente caracterizado por grandes flutuacións na velocidade do fluxo de aire. A sedimentación pode, con todo, pode empregar en ausencia de dispositivos máis sofisticados ou fonte de enerxía eléctrica.

Determinación do número de microbiana realizada polo método Omelyansky. Segundo isto, durante 5 minutos, sobre unha área de superficie de 100 ágar cadrado. cm instálase unha serie de bacterias está presente en 10 litros de aire.

Solicitar 535 "Sobre a unificación de métodos microbiolóxicos de investigación"

análise bacteriológica ocupa un lugar importante nas actividades complexas clínicos e de laboratorio que pretenden o diagnóstico, prevención e tratamento de varias enfermidades infecciosas. Con todo, o estudo do medio, non son limitados.

De particular importancia é a análise bacteriológica do material biolóxico en hospitais. Para a investigación realizada nas unidades de saúde, aumento requisitos. O propósito da Orde "On a unificación de métodos microbiolóxicos de investigación" é mellorar a análise bacteriológica, mellorar a calidade e eficiencia dos diagnósticos microbiolóxicos.

O exame microscópico de esfregaços en mulleres

É un método fundamental de análise para o diagnóstico de infeccións, infeccións de transmisión sexual e infeccións oportunistas (bacterias oportunistas).

A análise microscópica para avaliar a composición cualitativa e cuantitativa da microflora, comprobar a corrección de mostraxe. Por exemplo, a presenza do epitelio vaxinal en mostras de tecidos da canle cervical indica unha violación das regras de selección dunha mostra biolóxica.

Dise que o exame microbiolóxico, neste caso, é xeralmente seguido por algúns problemas. Están relacionados co feito de que o trato xenital inferior adoita presentan unha microflora diversificada que varía en diferentes idades. Para mellorar a eficacia da investigación e desenvolveron normas estandarizadas.

Diagnóstico de infeccións virais

É levada a cabo a través de métodos de detección de ARN e de ADN patógenos. Eles baséanse esencialmente na determinación de secuencias de nucleótidos en material patolóxico. Para este fin, as sondas moleculares. Son producidos artificialmente ácidos nucleicos complementarias a (complementaria a) os ácidos virais marcadas cun marcador radioactivo ou biotina.

A peculiaridade do método é repetida copiar o fragmento de ADN específico contén algúns centenares de (ou decenas de pares de nucleótidos). replicación (copia) é que extensión pode comezar só nalgunhas unidades. iniciadores (primers) utilizados para crealas. Son oligonucleotídeos sintetizados.

PCR de diagnóstico (reacción en cadea da polimerase) é simple en execución. Este método permítelle obter rapidamente o resultado usando unha pequena cantidade de material patolóxico. Usando PCR diagnóstico identifica infeccións latentes (ocultos) aguda, crónica e.

Cando a sensibilidade deste método é considerado máis preferíbel. Con todo, os sistemas de probas actuais non son fiables o suficiente, entón o diagnóstico PCR non pode substituír completamente os métodos tradicionais.