Medio Ploskireva (Bacto-agar F): descrición. Microbioloxía médica

Ploskireva medio (en diante aínda Bacto Agar F) é un medio nutriente para a cultura de certos microorganismos, principalmente de Shigella e Salmonella. Como unha fonte para os seus materiais infectados uso: urina, bile, feces.

historia

Nikolay Ivanovich Ploskirev - microbioloxista Soviética e doutor Honrado. Naceu en 1869 e morreu en 1948, traballando máis da súa vida na súa cidade natal - Tomsk.

En 1888, el, o científico futuro, sen completar a venres serie da escola, entrou no exército. foi capaz de completar o adestramento só en 1892, a continuación, pasou os exames de admisión á Tomsk Universidade Imperial, estudou na Facultade de Medicina. En 1898 recibiu o título de doutor.

Ploskirev participou na guerra ruso-xaponesa, e despois traballou no hospital Tomsk. En 1910 foi nomeado para o cargo de xefe do hospital dermatolóxico e venérea Tomsk, e durante trinta anos foi a súa cabeza permanente. O mesmo científico foi un dos fundadores da STI clínica en Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev escribiu unha serie de obras dedicadas á loita contra as enfermidades venéreas.

estrutura

Mércores Ploskireva - material para o cultivo de bacterias intestinais e, polo tanto, debe conter varios tipos de nutrientes. É producido en forma seca.

Moi unha gran proporción do seu peso total é de espadilha hidrólise pancreático (10,4 g / l). Lixeiramente menos representaban hidrocitrato sódico dibásico (8,5 g / l). Tamén hai un caldo de nutrientes e azucre do leite (8,62 e 7,3 g / l) seco.

A contorna Ploskireva segundo título - J. Bacto-ágar na composición está presente nunha cantidade de ágar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo contido de sodio anhidro igual a 5,1 g / l. Hai a presenza de fosfato dissódio anhidro - 2,1 g / l, sales de sodio ácido eólico uns 3,46 g / L e carbonato de sodio - 2,4 g

Menos que un gramo nel contido indicadores - vermello neutro (0,05) e verde brillante (0,0002). O contido de iodo - 0,13.

aplicación

O estudo dos procesos bioquímicos de bacterias xoga un papel moi importante no diagnóstico de enfermidades que causan organismos anaerobios. Especies desta familia - centos de persoas. Son case idénticas na morfoloxía e propiedades culturais, e xeito máis fiable para distinguilo los uns dos outros - é o estudo da bioquímica.

O estudo comeza coa inoculação de material patolóxico para o medio de cultivo. Ela diferencial patolóxico para as bacterias coliformes e unha parte do mesmo, ademais de agar simple, inclúe luz e lactosa. capacidade de procesamento de lactosa - un sinal importante de diferenciación de enterobactérias. Se iso é descuberto, o pH desprázase á acidez eo indicador está activado, o que converte a colonia.

Outros países poden usar outros medios de nutrientes, pero o seu mecanismo de acción corresponde á tres máis comúns en Rusia - este ambiente Endo e Levine Ploskireva mércores.

Descrición do método de

No exterior medio Ploskireva analóxico é un así chamado ágar MacConkey. En solución transparente forma acabada ten unha cor rosa-amarillo claro. As colonias capaces de procesar a lactosa, entre Ploskireva dar vermello (cranberry) cor. As bacterias non poden proceso-lo, ou colonia é incoloro ou ten unha cor feble.

Dado que a composición do medio inclúe substancias inhibidores Ploskireva (verde brillante, sales biliares, iodo), que é inhibe case completamente o crecemento da flora Gram-positiva, como o primeiro eshehiry día retarda significativamente o crecemento, así como outros microflora concomitante habitual.

segunda perna

Ademais de interese é a selección da colonia, e é sementada nun medio de almacenamento primario e diferenciación. Ambiente no que hai sementeira debe conter varios substratos. A cultura bacteriana debe detectar actividade enzimática en relación aos mesmos, para o mesmo medio, colocados no interior dos tubos de xeito que hai dous lugares:

• unha na que a Agar inclinado;
• cunha columna.

O interese de investigadores na porción chanfrada colonia cuberta vertedura densa e dunha columna de - unha picada. Nesta fase, o medio utilizado Russell, KLIGLER ou Olkenitskogo. Como diagnóstico diferencial usados e ambiente Ploskireva.

Microbiology and patóxenos organismos

Agar Ploskireva é un factor importante para a detección de infeccións causadas por Enterobacteriaceae. Así, por exemplo, é cultivado e colonias de microorganismos que causan disentería bacilar diferenciado. A anaeróbicas organismos pertencentes ao xénero Schigella.

Como todos os que forman parte dunha familia de bacterias intestinais, Shigella ten a forma de punta, do tamaño de dous micrómetros. Non constitúen cápsulas e esporas posúen flaxelos - que lles permite ser distinguido de Salmonella, que, á súa vez, son móbiles. Eles crecer ben na maior parte dos medios simple, a unha temperatura lixeiramente por enriba da temperatura ambiente (35-37 ° C) e 7,4 de pH. Pola natureza do crecemento, as colonias non difiren Salmonella.

Como discutido anteriormente, os microorganismos poden ser substancialmente diferenzas morfológicas, con todo, variar significativamente en procesos bioquímicos de vida. Así, excepto para Shigella Nyukestl, sen a formación de gas de ácido ocorre durante a fermentación de carbohidratos. Coa excepción de Shigella sonnei, non poden fermentar a lactosa, pero é digerido glicosa. Só as características clave, pode cargalos o que poden para reducir niraty a nitrito. As súas colonias foron digeridos con urea, así como no medio de cultura hai licuefacción de gelatina.

Recollida e preparación de sementes

Para detectar axentes de disentería, son necesarios probas microbiolóxicos ambientes infestados, ou sexa, as feces do paciente. Tras a recepción do material, ten que o máis rápido posible para facer a sementeira. Se iso non funciona, a fonte debe ser colocado nun conservante - mestura de tapón fosfato ou glicerol. A 4 ° C, poden ser almacenadas durante máis dun día. Recolle-se o material debe ser levada a cabo a través dun tubo de vidro rectal que é inserida no recto.

Para os estudos de material seleccionado pezas moco purulento de ser lavado en dous a tres tubos de solución isotônica de cloruro de sodio.

Aplicación de bacterias patóxenas no ámbito Ploskireva feito espátula de vidro. Hai que fregar sobre unha pequena parte da súa ágar, entón arrincar espátula sobre o medio ambiente, eo material residual é fregada na superficie sementada. A sementeira faise en algúns vasos, e despois a cada un deles ten plantar un novo lote.

Pedazos moco-purulentas alí asumir unha análise dedicada, iso non significa que non hai presenza de patógenos. En tal caso, é necesario para emulsificar feces en 10 ml de cloruro de sodio (concentración de 0,85%) e, a continuación, sementar unha ou dúas gotas de forma Ploskireva. materia non emulsionado pode ser sementada en caldo selenitovy. Tamén usou si, no canto das feces son vómitos ou lavados.

diagnóstico microbiolóxico

Na primeira fase de estudos microbiolóxicos realizados sementeira de bacterias patóxenas en dous vasos, a continuación, para asistir como crecer Shigella. O mércores Ploskireva produciu unha colleita, eo segundo - o ambiente ou Endo Levin.

Debido ao feito de que foron as cepas de Shigella son resistentes a antibióticos, para o medio foi suplementado con cloranfenicol. Logo ocorre dentro duns días de incubación nun incubador a 37 º C.

O segundo día de explorar as colonias crecidas. Aqueles que non están no medio de diagnóstico diferencial crecendo incoloro, cómpre eliminar curto ou medio de Russell "liña heteroxéneo". Máis investigacións están sendo conducidas polo algoritmo das culturas primarias sobre eles. Colonias de Shigella mércores Ploskireva crecer en forma de columnas transparentes, incoloros e pequenos. Son de dous tipos:

• achatada con bordes irregulares;
• arredondada, convexa, cun brillo típico mollado.

Tres ou catro colonias deben mikroskopirovat e examinado para a mobilidade. Se este último non aparecen, eles se mudaron o mércores Olkenitskogo para illar unha cultura pura. En ausencia de colonias características Shigella ou na ausencia de crecemento é observado en todo, é necesario Endo ágar ou Ploskireva produto sementeira de caldo selenitovogo. As colonias típicas están presentes en números suficientes, poñer a aglutinación estimado. Unha mestura de soros sonnei e Flexner, reacción ocorre sobre o vidro.

máis investigacións

O terceiro día, hai cambios que se produciron nas colonias no medio Russell. Se hai unha cultura que non degrada a lactosa e glicosa fermenta para producir un ácido, que é separado e analizado, pasar microscopia, así como efectuar a sementeira en "liña heteroxéneo", pero esta vez expandido. Basta pór a reacción de aglutinación, a fin de identificación sorológica.

O último día, pódese concluír, en base a cambios na "número heteroxéneo" (se non é a fermentación de carbohidratos), así como reduce a reacción de aglutinación.

Almacenamento e preparación

Preparación de ágar Ploskireva ocorre como segue:

1. 55 g de sustancia seca é axitada nun litro de auga destilada.
2. Fervida durante dous a tres minutos o ágar non é aínda totalmente derretido.
3. Verter en placas de Petri (opcional esterilidade) capa de 5-6 mm.
4. Os sinais son deixadas en aberto para unha media hora a temperatura ambiente (18-25 graos). Logo deste tempo, a forma é suficientemente endurecer e seco.

Mércores Ploskireva fotossensível e higroscópico. O po debe ser almacenado nun envase selada, a humidade relativa na sala non debe ser superior ao 60%. A temperatura óptima para o almacenamento de 2 ° C a 25 º C. O almacenamento debe cumprir con estas regras, se non posibles resultados imprecisos.